Kvalitativna analiza za hepatitis C

Pustite komentar 9.080

Kvantitativna analiza polimerazne verižne reakcije - PCR za hepatitis C določa prisotnost ali odsotnost HCV v telesu. V laboratorijskih pogojih se proučuje struktura RNK, ki bo vključeval virus. V primeru odkritja virusa C je treba zdraviti, saj bo zapostavljeno stanje jeter povzročilo hude posledice. Visokokakovostni PCR se prav tako izvaja po okrevanju, da potrdi odsotnost protiteles. Dodeljeno za rutinske preglede. Z nizko koncentracijo povzročitelja v krvi, PCR (kvalitativna) morda ne zazna ničesar, ker diagnostični sistem ima svoje prage občutljivosti. V primeru začetne faze bolezni ali blagih oblik se ultra ultra diagnostike izvajajo na ultra občutljivi opremi.

Kaj je virus RNA?

Izraz RNA virusa hepatitisa C (ali RNA virusa hepatitisa C) je sama bolezen jeter. Virus C se veže na zdravo celico telesa s prodiranjem v notranjost. Sčasoma se razprostira po telesu, je potrebno le priti v kri. Posledično patogen prodre v jetra, varovalke s svojimi celicami in trdo deluje. Jetrne celice (hepatociti) delujejo pod svojim vplivom, spreminjajo se in od tega umirajo. Dlje, ko je virus C v jetrih, večje število celic umre. Sčasoma razvite nevarne bolezni, ki povzročajo maligno degeneracijo in smrt.

Okužba jeter s to vrsto virusa se ne kaže na zunaj. Že več let ali desetletja se okuženi osebi zdijo povsem zdravi in ​​samo naključni pregled najpogosteje razkrije patologijo. Pri darovanju krvi za hepatitis proučujemo del verige RNK (ribonukleinske kisline), ki je del človeškega gena (DNK). Rezultati laboratorijskih testov se ne smejo uporabljati za samozdravljenje, ker je to le indikator. Natančno sliko in nadaljnjo diagnozo bolje določi zdravnik.

Ko končate: indikacije za raziskave

Pri potrditvi HCV se izvede PCR analiza (polimerazna verižna reakcija). Študije PCR pomagajo najti patogeni material v strukturi RNA in predpisati učinkovito zdravljenje. Imenuje se v naslednjih primerih:

  • odkrivanje znakov vnetja jeter;
  • presejalne študije za preprečevanje;
  • pregled oseb, ki so v stiku;
  • diagnoza hepatitisa mešanega izvora (določitev glavnega patogena);
  • določanje stopnje reprodukcijske aktivnosti virusa v kronični obliki;
  • ciroza jeter;
  • za določitev učinkovitosti predpisanega zdravljenja.
Študije o PCR predpisuje zdravnik, da določi učinkovitost zdravljenja za hepatitis.

Obstaja kvalitativna in kvantitativna analiza PCR. Kvantitativni PCR prikazuje odstotno razmerje med RNA in nosilci virusov v krvi, kakovost pa kaže na virusno prisotnost ali odsotnost. Pozitiven kazalnik kakovosti (prisotnost RNK hepatitisa C) potrebuje tudi kvantitativne raziskave. Visoka stopnja koncentracije povzročitelja hepatitisa C je povezana s tveganjem prenosa, to je okužbe drugih. Nizka števila so boljša za zdravljenje. Količina virusa RNA v krvi ni povezana z intenzivnostjo bolezni. PCR analizo opravimo tudi v primeru interferonske terapije, da bi predpisali trajanje in kompleksnost zdravljenja.

Značilnosti visoko kakovostne PCR analize za hepatitis C

Kakovostna analiza z indeksom verižne reakcije s polimerazo je dodeljena vsem bolnikom, ki imajo v krvi protitelesa proti hepatitisu C. Tisti, ki so bili bolni in so bili ozdravljeni, morajo ponovno opraviti test. Priporočamo, da test za hepatitis B opravite, v primeru pozitivnega zaključka in pri hepatitisu D. Tudi kakovostno analizirana reakcija je treba opraviti v povezavi z drugimi krvnimi preiskavami. Analize bodo pokazale popolno sliko širjenja virusa.

Iz rezultatov testa bo viden ali negativen samo pozitivni test za hepatitis C, to je prisotnost ali odsotnost virusa. Če je izhod "zaznan", potem je virus še vedno aktiven. Oznaka "ni zaznana" označuje odsotnost virusa ali majhne količine. S tem indikatorjem je treba upoštevati, da je analitska občutljivost diagnostičnih sistemov drugačna in da je RNA hepatitis C še vedno v krvi, vendar se v analizi ne kaže.

Zelo občutljiva PCR metoda ultra hepatitisa C razkriva celo v skromnih količinah. Uporabljena je študija hibridizacije fluorescence, ki je večkrat večja od standardnih PCR sistemov. Metoda se uporablja v več primerih:

  • sumljive skrite oblike hepatitisa C;
  • Diagnostika PCR ni potrdila patogena, ampak obstajajo protitelesa;
  • v primeru izterjave;
  • za odkrivanje zgodnje okužbe.
Nazaj na kazalo

Analiza dekodiranja

PCR dekodiranje HCV vpliva na dokončno odločitev pri diagnosticiranju, zlasti z metodo ultrametoda. Glavna pomanjkljivost te študije je strogo spoštovanje sterilnih pogojev za vzorec in materiale. Rahlo odstopanje včasih kaže netočne analitične zaključke, otežuje diagnozo in nadaljnje zdravljenje. Analiza PCR za določanje RNA hepatitisa ne kaže vedno slike z boleznijo, včasih so netočnosti dovoljene in v obe smeri.

Pri diagnosticiranju virusa hepatitisa je priporočljivo uporabiti celovit pregled.

Norm kazalnikov

Odsotnost JgM protiteles proti virusnemu hepatitisu C v rezultatih študije velja za normo pri analizi verižne reakcije polimeraze. Hkrati ugotovitve serološke analize kažejo na prisotnost protiteles proti virusu C in to je tudi v normalnem obsegu. Kvalitativna definicija ne kaže intenzivnosti bolezni, le odkrije vzročni povzročitelj hepatitisa C v RNA. Ta analiza se ponovi po zdravljenju, da se potrdi dejansko okrevanje.

Odstopanja

Če so prisotna JgM protitelesa proti HCV RNA, to kaže na razvojno okužbo. Bolezen hkrati poteka akutno ali kronično, ki se kaže v različnih fazah. Če se zabeleži zmanjšanje števila protiteles, bo analiza pokazala, da so bili rezultati zdravljenja doseženi med okrevanjem. V diagnozi najdemo le izredno redke primere lažnih pozitivnih rezultatov. Najdejo jih pri ženskah med nosečnostjo in pri ljudeh z drugimi nalezljivimi boleznimi.

Stroški testiranja krvi in ​​PCR za hepatitis C

Hepatitis C je vnetna patologija, na katero vplivajo jetrne celice. Bolezen se razvije kot posledica penetracije virusa hepatitisa C (HVC) v človeško telo.

Oblika bolezni je lahko akutna ali kronična.

Najpogosteje so simptomi akutne oblike patologije pri večini bolnikov odsotni, včasih bolezen spremljajo boleče občutke v trebuhu, zmanjšana učinkovitost, povečana utrujenost, izguba apetita, temen odtenek urina, razbarvanje blata, žilavost kože in sluznice, bolečine v sklepih. Takšni simptomi se ponavadi pojavijo 6-8 tednov po okužbi, vendar se lahko pojavijo po šestih mesecih.

Z razvojem takšnih pojavov je treba vzpostaviti stik z zdravstveno ustanovo in opraviti celovit pregled celotnega organizma. V okviru zdravniškega pregleda opravimo krvni test za hepatitis C.

Danes s pomočjo sodobnih diagnostičnih tehnik lahko to patologijo identificiramo v začetni fazi razvoja, kar močno poveča možnosti popolnega zdravljenja bolezni.

Naslednje skupine ljudi morajo testirati na hepatitis C:

  • ženske v času dojenčka;
  • osebe z znaki hepatitisa;
  • medicinsko osebje;
  • potencialni organ in darovalci krvi;
  • odvisniki od drog, okužene s HIV, nesmiselno intimno življenje.

Seznam potrebnih študij

Kakšne teste naj opravim za hepatitis C? Da bi natančno diagnosticirali bolezen, ugotovili vzroke in ugotovili stanje jetrne parenhima, so potrebne naslednje študije:

  • splošni test urina in krvi;
  • biokemijska analiza krvi;
  • PCR analiza;
  • krvni test za odkrivanje protiteles proti HVC;
  • krvni test za obstoječa protitelesa proti lastnim jetrnim celicam;
  • biopsija jeter.

Dekodiranje krvnih preiskav za hepatitis C izvaja specialist. Raziščite vsako metodo raziskav podrobneje, prav tako pa bomo razumeli, katera analiza hepatitisa C je najbolj natančna.

Splošna analiza

Pri splošnem testu krvi za hepatitis C lahko ocenite bolnikovo stanje. Spremembe parametrov krvi se ne zaznajo kot specifični simptomi hepatitisa, vendar s to boleznijo obstajajo naslednje motnje:

  • zmanjšana koncentracija hemoglobina, trombocitov in levkocitov;
  • povečuje vsebnost limfocitov;
  • krvavitev krvi je kršena;
  • Stopnja sedimentacije eritrocitov (ESR) se poveča.

Splošna analiza urina omogoča, da v svoji sestavi odkrije urobelin - žolčni pigment, ki se pojavi v urinu zaradi motenega delovanja jeter.

Biokemijska analiza

Biokemijska analiza krvi pri hepatitisu C omogoča prepoznavanje takšnih motenj kot:

  • zvišane ravni jetrnih encimov (alanin transaminaza - ALT in aspartat aminotransferaza - AST), ki vstopajo v kri, ko so poškodovani hepatociti. V normalnem stanju ti indikatorji za moške ne smejo biti večji od 37 IU / l, pri ženskah pa ne več kot 31 IU // l. Povečana koncentracija ALT in AST pri asimptomatičnem hepatitisu C je pogosto edini simptom te bolezni. Poleg tega se alkalna fosfataza glutamil transpeptidaze zviša (običajno ne presega 150 IU / l).
  • Vsebnost bilirubina (tako splošne kot neposredne) v krvi je presežena. Če raven rumenega pigmenta v serumu presega 27-34 μmol / l, se pojavi zlatenica (do 80 μmol / l v blagi obliki, 86-169 μmol / l - v zmernem, nad 170 μmol / l - v hudi obliki).
  • Raven albumina se zmanjša, nasprotno pa se poveča koncentracija gama globulinov. Gamma globulini so sestavljeni iz imunoglobulinov - protiteles, ki ščitijo telo pred snovmi, ki povzročajo bolezni.
  • povečana koncentracija trigliceridov v krvi.

PCR test

Z uporabo tehnike PCR je možno diagnosticirati povzročitelja bolezni. Izvajanje te analize omogoča odkrivanje virusa v krvi, čeprav je njegova količina minimalna. Analiza PCR za hepatitis C omogoča ugotavljanje obstoječe okužbe v krvi že po 5 dneh od trenutka okužbe, to je že dolgo pred pojavom protiteles.

Če je rezultat krvnega testa za hepatitis C s PCR pozitiven, to kaže na prisotnost aktivne okužbe v telesu. S to metodo lahko opravite kvalitativno in kvantitativno študijo HVC RNA.

V času kvalitativne analize PCR za hepatitis C je možno odkriti obstoječi virus v človeškem telesu.

Ta diagnostični postopek se izvede, če se v krvi odkrije anti-HVC.

Dešifriranje analize za hepatitis C vsebuje podatke, da je bila okužba ugotovljena ali ni bila odkrita v telesu. Običajno v krvi ne najdemo patoloških snovi.

Če je test hepatitisa C pozitiven, to pomeni, da patogen stalno deli in okuži celice jeter.

Rezultati te analize so lahko nezanesljivi, možni so v naslednjih primerih:

  • uporabljeni onesnaženi biomaterial;
  • v prisotnosti heparina v krvi;
  • v prisotnosti kemijskih ali beljakovinskih snovi (inhibitorjev) v preučevanem biomaterialu, ki vplivajo na elemente PCR.

Kvantitativna analiza hepatitisa C vsebuje podatke o količini virusa, vsebovanega v krvi, ki določa viralno obremenitev. S tem konceptom je mišljen obseg HVC RNA, ki je prisoten v krvi (na primer v 1 ml). Pri interpretaciji kvantitativne analize za hepatitis C se ta vrednost izrazi v digitalnem ekvivalentu, merjeno v IU / ml.

Pred terapevtskimi ukrepi se vzame krv za PCR za hepatitis C. Po analizi se izvede 1, 4, 12 in 24 tednov. Študija v 12. tednu je okvirna in se izvaja za oceno učinkovitosti medicinskih postopkov.

Če je test za hepatitis C med nosečnostjo pozitiven in presegajo vrednosti virusnega bremena, se tveganje prenosa patogenov od bolne matere na otroka poveča večkrat. Tudi pri zvišanih vrednostih virusnega bremena je izvajanje terapevtskih ukrepov težavno.

V skladu s prepisom testov za hepatitis C, če vrednosti virusne obremenitve presegajo 800.000 ie / ml, potem je to visoka. Če so številke pod 400.000 IU / ml, se raven virusne obremenitve šteje za nizko.

Analiza hepatitisa C s PCR se šteje za najbolj točno in ima več prednosti pred drugimi raziskovalnimi opcijami, in sicer:

  • neposredno diagnozo povzročitelja bolezni. Pri opravljanju tradicionalnih študij se določi s prisotnostjo beljakovinskih markerjev, ki so odpadni produkti patogenov. To samo kaže, da je okužba prisotna v krvi. Pri testiranju hepatitisa C s PCR je mogoče določiti tip patogena nevarne patologije.
  • specifičnost tehnike. V tem postopku se v biomaterialu določi edinstvena DNA regija, ki ustreza samo eni vrsti patogena. To zmanjšuje verjetnost napačnih rezultatov.
  • visoka občutljivost. Pri izvajanju PCR analize lahko odkrijete najmanjšo količino virusa. To je pomembno, če se ugotovijo pogojno patogene snovi, ki ogrožajo le, če se njihova raven poveča.
  • Pri uporabi te tehnike v enem vzorcu biomateriala je mogoče takoj odkriti več patogenov.
  • lahko odkrijejo skrite okužbe. Poleg tega analiza omogoča diagnosticiranje patogenih mikroorganizmov, ki živijo znotraj celic in imajo visoko antigensko spremenljivost.

Če so rezultati testa pozitivni, sledi virusa najdemo v biomaterialu, potem ima mreža okužbo v telesu.

Negativna analiza PCR za hepatitis C pomeni, da v biomaterialu ni sledov okužbe.

Imunološka študija

Ta metoda omogoča identifikacijo protiteles proti vsem vrstam virusa hepatitisa in protitelesa proti celicam jeter v svojem telesu, katerega videz prispeva k razvoju avtoimunskega hepatitisa.

Rezultati, pridobljeni med študijo, so pomembni za 3 mesece, potem morate ponoviti krv za hepatitis C.

Prav tako je mogoče izvesti izrecno študijo s posebnimi testnimi trakovi. Ta analiza omogoča določanje protiteles proti virusu C v sestavi krvi in ​​sline. Ta postopek je mogoče samostojno opraviti doma.

Biopsija jeter

Za izvedbo takšne analize jemlje element parenhimije jeter in izvede se histološki pregled dobljenega biomateriala. To vam omogoča, da ocenite stanje telesa: ugotovite vnetne, nekrotične žarišča, stopnjo fibroze in tako naprej.

Danes se uporabljajo testi, ki nadomeščajo histološko analizo jetrnega parenhima.

Za oceno stopnje poškodbe jeter in intenzivnosti vnetnega procesa se uporabljajo specifični biomarkerji venske krvi. Z uporabo zdravila FibroTest lahko ocenite stopnjo rasti fibroznega tkiva.

Pri izvajanju zdravila Actitest lahko dobite informacije o intenzivnosti patoloških procesov v jetrnem parenhimu. Uporaba zdravila Steatototesta lahko diagnosticira maščobno tkivo jeter in oceni obseg tega procesa. Fibromax sestoji iz vseh zgornjih testov in lahko vključuje nekatere druge študije.

Priprava na študijo

Kakšne teste jemljemo za hepatitis C in kako smo ugotovili to ali drugo vrsto raziskav. Enako pomembno je vedeti, kako se pripraviti na analizo.

Za pridobitev zanesljivih rezultatov priporočamo, da upoštevate naslednje zahteve:

  • Preizkus hepatitisa C je treba jemati zjutraj na prazen želodec. Zadnjič je treba živilo porabiti najmanj 8 ur pred študijem.
  • Biomaterial lahko zbirate podnevi ali zvečer. V tem primeru je pomembno, da med zadnjim obrokom in analizo poteka najmanj 5-6 ur.
  • pred darovanjem krvi za hepatitis C, čaj, kavo, sok ali druge pijače je treba zavreči, dovoljena je le voda.
  • 48 ur pred študijo je treba izključiti uporabo maščob, ocvrtih živil in alkoholnih pijač.
  • vsaj eno uro pred analizo se morate vzdržati kajenja.
  • analize ne bi smeli opraviti takoj po ultrazvočnem, instrumentalnem, rentgenskem pregledu, masažo ali fizioterapiji.
  • en dan pred izvedbo študije je treba izključiti uporabo zdravil in intenzivno telesno aktivnost. Tudi emocionalni stres je kontraindiciran.
  • Priporočljivo je, da preživite 15 minut pred izvedbo študije v mirnem stanju.

Izvajanje postopka zbiranja krvi

Kje se preizkusiti na hepatitis C? Vzorčenje biomaterialov za nadaljnje raziskave poteka v laboratoriju zdravstvene ustanove ali pacientovega doma.

Krv iz vene se vzame na naslednji način:

  • s pomočjo posebnega pokrova, ovitega okoli pacientovega podlakta, se venski krvni tok ustavi. Zahvaljujoč takšnim manipulacijam bodo žile napolnjene s krvjo in bodo bolj vidne, kar bo v veliki meri olajšalo postopek vstavljanja igle.
  • območje kože, kjer bo vstavljena igla, skrbno obdelamo z alkoholom ali tekočino, ki vsebuje alkohol.
  • Igla se nežno vstavi v veno, nato pa je nanjo pritrjena epruveta, posebej zasnovana za zbiranje krvi.
  • Takoj po vstavitvi igle v veno se stisnjen pas odstrani iz pacienta.
  • Po zbiranju volumna krvi, potrebnega za analizo, iglo nežno odstranimo iz vene.
  • na mesto injiciranja je treba uporabiti sterilni bombažni blazin ali gazi, ki se navlaži z alkoholom.
  • Da bi preprečili nastanek hematoma, je treba tampon z malo napora pritisniti na območje za vstavljanje igle, upogniti roko na komolčni sklep in ga zadržati v tem položaju za nekaj minut. Taka dejanja bodo tudi pripomogla k hitrejši zaustavitvi krvi.

Če je tehnika notranjega delovanja dobra, je ta postopek popolnoma varen in ne povzroča bolečih občutkov.

V redkih primerih se lahko krvne žile pobreknejo. Ta pojav se imenuje "flebitis". Stisk (ne vroče) bo pomagal rešiti problem, ga je treba nanesti na otekle dele kože večkrat na dan.

Nekatere težave se lahko pojavijo tudi pri motnjah krvavitve. Jemanje aspirina, varfarina in drugih razredčilcev v krvi lahko povzroči krvavitev. Zato je pred izvedbo analize treba zavrniti kakršno koli zdravilo. Če zdravljenja ni mogoče preklicati, morate o tem obvestiti strokovnjaka.

Datumi in cene

Koliko se testira na hepatitis C? Rezultati krvnega testa za hepatitis so lahko pripravljeni v nekaj urah in v nekaj dneh (praviloma ne več kot 8 dni). Trajanje priprave rezultatov je odvisno od vrste virusa in izbrane metode analize. Hitrejša je študija, izvedena z metodo PCR. Rezultati v tem primeru bodo pripravljeni v samo nekaj urah.

Koliko stane hepatitis C test? Odvisno od klinike in kompleksnosti študije se lahko cena postopka razlikuje od 400 do 11.000 rubljev.

Zavedati se morate, da lahko traja nekaj tednov, da se tvori zadostna količina protiteles proti HVC. Zato je v zgodnji fazi razvoja patologije rezultat študije lahko lažno negativen.

Poleg tega je mogoče pridobiti nezanesljive podatke s slabo kakovostno analizo in kršitvijo pogojev prevoza pridobljenega biomateriala (vzorce je treba dostaviti v laboratorij največ 2 uri po vzorčenju krvi).

Če je rezultat študije pozitiven, se morate takoj obrniti na zdravnika za nalezljive bolezni. Specialist bo opravil dodaten pregled in predpisal ustrezno zdravljenje.

Izvedba analize PCR za hepatitis C in dekodiranje rezultatov

Analiza PCR za hepatitis C je študija, katere glavni namen je prepoznati genetski material povzročitelja. Analiza razkriva povzročitelje bolezni z uporabo verižne reakcije s polimerazo. Ta diagnoza ima visoko stopnjo natančnosti, specifičnost za odkrivanje odsotnosti ali prisotnosti virusne okužbe.

Bistvo diagnoze

Za izvedbo analize PCR za določanje virusa hepatitisa C od pacienta se vzame venska krv, ki potencialno vsebuje HCV želenega virusa RNA (ribonukleinska kislina).

Preizkus s PCR za hepatitis C implicira postopek, ko se pacientovim delcem krvi dodajo naslednje:

  • primerki (kratka umetna sintetizirana področja potrebnega gena);
  • poseben encim (polimeraza RNA).

Po zbiranju biološkega materiala se pošlje v raziskave v laboratorij. En del krvi je potreben za neposredno analizo PCR, drugi pa se pošlje študiji z metodo ELISA. Encim lahko v kratkem času poveča število genetskega materiala virusa patogena. V posebni napravi se izvaja več ciklov procesov toplote in hlajenja. Na zadnji stopnji dobljeni material primerjamo z geni virusa in sklepamo o prisotnosti ali odsotnosti patologije v telesu pacienta.

Bistvo in potek analize PCR v laboratoriju. Posnet s SiberianMedicalLaboratory.

Vrste raziskav

Obstajajo tri vrste diagnostike, ki omogočajo ugotavljanje prisotnosti virusa hepatitisa C v človeškem telesu:

  • genotipizacija;
  • kakovost;
  • kvantitativno.

Kvalitativna metoda

Diagnoza hepatitisa C s kvalitativno metodo se uporablja za bolnike, pri katerih se pri krvnem testu odkrijejo protitelesa proti virusu. V primeru prisotnosti akutne faze HCV RNK takšni diagnostični ukrepi omogočajo ugotavljanje prisotnosti bolezni v roku 1-2 tednov po okužbi. V tem obdobju se protitelesa proti hepatitisu C morda še ne razvijejo.

Kvantitativna metoda

Za ugotavljanje koncentracije virusa v vzorcih krvi se uporablja kvantitativna diagnostična metoda. Takšen test za viremijo (stopnja koncentracije) omogoča natančno določanje števila enot virusne RNK. Končni rezultat je izražen v ustreznem obsegu. Če govorimo o kvantitativni analizi, se indikatorji merijo v 1 ml (1 kubič. Cm).

Parameter virusne obremenitve pomeni stopnjo nalezljivosti bolezni, to pomeni, da odraža stopnjo "nalezljivosti" bolnika. V praksi to pomeni, da je višja koncentracija virusa v krvi, večje so možnosti, da pacient okuži druge s hepatitisom C. Kvantitativna metoda raziskovanja omogoča tudi ugotavljanje kakovosti in učinkovitosti opravljenega zdravljenja.

Genotipizacija

Genotipizacija razkriva mutacije povzročitelja bolezni. Pred predpisovanjem načrta zdravljenja je določen genotip virusa: kakovost in trajanje zdravljenja sta odvisna od tega. Na primer, pri zdravljenju bolezni tipa I je učinkovitost 60%, v primeru II, III - približno 80%.

Prednosti analize PCR za hepatitis

Med glavne prednosti postopka so:

  1. Možnost zgodnje diagnoze. PCR analiza je sposobna zaznati prisotnost virusa v zgodnjih fazah okužbe.
  2. Nizki rezultati napak. Preučevani biološki vir vam omogoča diagnosticiranje dela genetskega materiala, ki je značilen samo za eno vrsto virusne okužbe. Ta okoliščina omogoča preprečevanje lažnih diagnostičnih rezultatov.
  3. Visoka stopnja občutljivosti. PCR analiza je sposobna zaznati RNA virus v majhnih količinah, kar omogoča tudi pravočasno sledenje latentnih okužb.

Indikacije za

Testiranje na PCR za hepatitis C je potrebno, če je na voljo:

  • stiki z bolniki, ki bi lahko privedli do okužbe;
  • simptomi ciroze jeter (povečanje vranice, nenavadne spremembe velikosti jeter, odkrivanje venskega pleksusa na trebuhu pod kožo);
  • pozitivni rezultati ELISA;
  • povečana aktivnost AST in ALT (ki se kaže v biokemijski analizi krvi);
  • potrebo po nadzoru izvajanja protivirusnega zdravljenja;
  • začetno fazo zdravljenja za potrebo po vzpostavitvi virusne obremenitve;
  • izvajanje končne faze terapije za odpravo možnih ponovitev;
  • prisotnost hepatitisa B pri bolniku, ki izključuje razvoj mešane okvare jeter.

Kako se pripraviti za darovanje krvi za študije PCR

Priprava za analizo PCR vključuje naslednja priporočila:

  • kri je vzeta zjutraj;
  • analiza se opravi na prazen želodec, zato je priporočljivo odmik med zadnjim obrokom 8-10 ur;
  • nekaj dni pred diagnozo je treba izključiti maščobo, začinjeno in ocvrto hrano, alkoholne pijače in kajenje;
  • en dan pred analizo naj se vzdrži težkega fizičnega napora, izključite razrede v telovadnici ali bazenu.

Rezultati analize: norme in odstopanja

Sama analiza ni dolga, visokokvalificirani specialist hepatolog ali specialist za nalezljive bolezni pa dehripa rezultate PCR za hepatitis C. Na podlagi rezultatov analize je bolnik diagnosticiran.

Da bi pravilno razbrali rezultate raziskave, se upoštevajo naslednji kazalniki:

  • biokemijska analiza krvi;
  • ultrazvok podatkov;
  • rezultati biopsije.

Razlaga kvantitativne analize

Pri pridobivanju rezultatov kvantitativne analize PCR se upoštevajo naslednji kazalniki:

Osnovni preizkusi hepatitisa C

Virusni hepatitis C je resen zdravstveni in socialni problem. Okoli 180 milijonov ljudi na svetu danes trpi zaradi te bolezni, vsako leto umre 350 tisoč ljudi. Dolg latentni (asimptomatski) potek hepatitisa C vodi do pozne diagnoze. Analiza hepatitisa C se izvaja z namenom diagnosticiranja bolezni, diferencialne diagnoze, z njeno pomočjo določiti predhodno preneseno bolezen "stoj". Študija se uporablja pri bolnikih s simptomi hepatitisa C, zvišanih koncentracijah jetrnih encimov pri pridobivanju informacij o predhodno prenesenem hepatitisu nespecifične etiologije pri osebah s tveganjem in presejalnih študijah.

Diagnoza hepatitisa C se izvede v dveh fazah:

Faza 1 Določitev prisotnosti protiteles proti virusu hepatitisa C (anti-HCV) v serumu.

Faza 2 V prisotnosti anti-HCV se opravi test za prisotnost RNA (ribonukleinske kisline) s PCR za hepatitis C. Test omogoča identifikacijo faze procesa - "aktivna / neaktivna", da se reši vprašanje potrebe po zdravljenju. Znano je, da se približno 30% oseb, okuženih z virusom hepatitisa C, znebi okužbe same, saj imajo močan imunski sistem in ne potrebujejo zdravljenja. Uporaba PCR določi genotip virusa. Različni genotipi se drugače odzovejo na zdravljenje.

Stopnja poškodbe jeter pri hepatitisu C se določi z uporabo biopsije ali drugih invazivnih in neinvazivnih testov (na primer fibrotest). Stopnjo jetrne steatoze določa steatotesta. V vseh primerih naj diagnoza hepatitisa C temelji na podatkih iz epidemiološke preiskave, klinike bolezni in podatkov o biokemičnih preiskavah krvi.

Sl. 1. Hudi učinki virusnega hepatitisa C - intenzivni ascites.

Preskus s hepatitisom C: anti-HCV

Protitelesa proti HCV (anti-HCV) so specifični označevalci okužbe. V telesu bolne osebe se specifična protitelesa proizvajajo na proteine ​​virusa hepatitisa C (antigeni) - imunoglobulini razreda IgM in IgG (anti-HCV IgM / IgG).

Kadar se dobi pozitiven rezultat za protitelesa proti virusu hepatitisa C, se opravi potrditveni test - določitev skupnih protiteles proti strukturnim in nestrukturnim proteinom virusa. Strukturne ovojnice proteinov E1 in E2 virusov proizvedejo anti-HCV IgM, nukleokapsidni protein C-cor (anti-HCV IgG) in 7 nestrukturnih proteinov-encimov NS-anti HCV NS IgG.

Za odkrivanje protiteles proti virusu hepatitisa C se uporablja encimsko vezan imunosorbentni test (ELISA). Potrditveni testi - RIBA (rekombinantna imunoblotting), manj pogosto Inno-Lia (analiza sintetičnih peptidov) se uporabljajo za potrditev (+) rezultatov ELISA.

Anti HCV IgM

  • V serumu se pojavijo protitelesa HCV IgM 4-6 tednov po okužbi in hitro dosežejo maksimum. Na koncu akutnega procesa (po 5-6 mesecih) se njihova koncentracija zmanjša.
  • Dolgoročna registracija prisotnosti anti-HCV IgM kaže, da je hepatitis C pridobil kronični potek.
  • Povečanje ravni IgM v obdobju kroničnega hepatitisa C kaže na ponovno aktivacijo nalezljivega procesa.
  • Raven imunoglobulinov IgM vam omogoča, da ocenite učinkovitost zdravljenja.

Anti HCV IgG

Protitelesa HCV IgG se pojavijo v pacientovem serumu 11 do 12 tednov po okužbi. Pri 5-6 mesecih se zabeleži najvišja koncentracija. Naslednja protitelesa

ostanejo na stalni ravni ves čas trajanja bolezni v akutnem obdobju in med obdobjem okrevanja.

Skupna protitelesa proti virusu hepatitisa C

Skupna protitelesa proti virusu hepatitisa C (skupaj total HCV) se uporabljajo za diagnosticiranje "svežih" primerov bolezni. Skupna protitelesa so protitelesa proti proteinu C-cor (anti HCV IgG) in 7 nestrukturnih NS beljakovinskih encimov (anti HCV NS IgG) proti HCV NS3, proti HCV NS4 in proti HCV NS5.

Skupna protitelesa proti virusu hepatitisa C se pojavijo v serumu okužene osebe po 11 do 12 tednih od začetka okužbe, dosežejo najvišjo vrednost za 5 do 6 mesecev in ostanejo na konstantni ravni med celotnim obdobjem bolezni v akutnem obdobju in med 5 in 9 leti po obdobju okrevanja.

Vsaka vrsta protiteles ima neodvisno diagnostično vrednost:

  • AntiHCVC (kor) so glavni kazalci stika s hepatitisom C.
  • AntiHCVNS3 je odkril enega od prvih v procesu serokonverzije (produkcija protiteles kot odgovor na prisotnost virusa), kaže na resnost nalezljivega procesa in kaže na visoko virusno obremenitev. S svojo pomočjo se dedno hepatitis C določi pri bolnikih, ki ne sumijo, da imajo okužbo. Dolgotrajna prisotnost anti-HCV NS3 v serumu kaže na veliko tveganje za kroničnost postopka.
  • AntiHCVNS4 predlaga, da ima infekcijski proces dolg potek. Stopnjo titracij protiteles je mogoče oceniti glede na stopnjo poškodbe jeter.
  • AntiHCVNS5 kaže na prisotnost virusne RNK. Njihovo odkritje v akutnem obdobju je predhodnik kroničnega procesa. Visoki titri protiteles v ozadju zdravljenja kažejo, da se bolnik ne odziva na zdravljenje.
  • AntiHCVNS4 in antiHCVNS5. Ta vrsta protiteles se pojavlja v poznih fazah razvoja hepatitisa. Njihovo zmanjšanje kaže na nastanek remisije okužbenega procesa. Po zdravljenju se titri anti-HCV NS4 in anti-HCV NS5 zmanjšajo v 8 do 10 letih. Ta vrsta protiteles ne ščiti pred ponovno ozdravitvijo.

Sl. 2. Macrodrug jeter. Ciroza jeter pri hepatitisu C.

Analiza dekodiranja za hepatitis C

Odsotnost protiteles proti virusu hepatitisa C je označena z izrazom "Norm". Vendar to vedno ne pomeni odsotnosti bolezni pri ljudeh. Torej odsotnost protiteles v krvi okužene osebe se zabeleži, dokler se ne pojavijo v krvi - do 6 mesecev od trenutka okužbe (povprečno 12 tednov). Obdobje odsotnosti protiteles v krvi okužene osebe se imenuje "serološko okno". Testni sistemi 3. generacije (ELISA-3) imajo visoko specifičnost (do 99,7%). Približno 0,3% je predstavljalo napačne pozitivne rezultate.

Prisotnost anti-HCV kaže na trenutno okužbo ali preteklo okužbo.

  • Odkrivanje protiteles IgM in proti HCV Cor Cor IgG, zvišanje titrov protiteles proti HCV CorE IgG in (+) PCR rezultatov v prisotnosti kliničnih in laboratorijskih znakov akutnega hepatitisa kaže na akutno obdobje bolezni.
  • Odkrivanje anti-IgM, anti-HCV Coré IgG, anti-HCV NS IgG in (+) PCR rezultat v prisotnosti kliničnih in laboratorijskih znakov hepatitisa kaže na ponovno aktivacijo kroničnega hepatitisa C.
  • Odkrivanje anti-HCV Coré IgG in anti-HCV NS IgG v odsotnosti kliničnih in laboratorijskih znakov hepatitisa in negativnega rezultata PCR kaže, da ima bolnik kronični hepatitis v latentni fazi.

Sl. 3. Macrodrug jeter. Primarni jetrni rak. Eden od razlogov za razvoj onkologije je ciroza jeter, razvita na ozadju kroničnega hepatitisa C.

PCR analiza za hepatitis C

Verižna reakcija s polimerazo (PCR) je "zlati standard" za diagnozo viralnega hepatitisa C. Visoka občutljivost testa omogoča odkrivanje genskega materiala virusa (RNA), tudi če je v študijskem gradivu le nekaj izmed njih. PCR je sposoben zaznati RNA viruse že dolgo pred pojavom protiteles v serumu, vendar ne prej kot od petega dne od trenutka okužbe. Ko bolezen odkrije s PCR, se virusi RNA odkrijejo ne samo v serumu, temveč tudi v biopatih jeter.

  • Verižna reakcija v polimerazi omogoča ugotavljanje prisotnosti ali odsotnosti virusa hepatitisa C v krvi in ​​odločitev o začetku zdravljenja. Znano je, da se do 30% bolnikov sami znebi, saj imajo močan imunski sistem in ne potrebujejo zdravljenja.
  • PCR za hepatitis C se uporablja za spremljanje učinkovitosti zdravljenja.
  • PCR se uporablja v odsotnosti protiteles v krvi, vendar ob prisotnosti močnih sumov hepatitisa C (povišane ravni alkalne fosfataze, celotnega bilirubina, 2-kratnega presežka jetrnih encimov AST in ALT).
  • PCR analiza za hepatitis C se uporablja za nadzor intrauterinega prenosa virusa hepatitisa.

Virusna obremenitev s hepatitisom C

Z uporabo PCR analize je mogoče ugotoviti ne le prisotnost virusa RNA v krvi - kvalitativna analiza (odkrita / ni zaznana), vendar njihova številka - virusna obremenitev (število enot virusne RNK v 1 ml krvi). Kvantitativni indikator PCR se uporablja za spremljanje učinkovitosti zdravljenja hepatitisa C.

Metode, uporabljene za PCR, imajo različno občutljivost. V Ruski federaciji se v skladu z metodološkimi priporočili iz leta 2014 priporoča uporaba metod, ki imajo občutljivost 25 ie / ml ali manj. V skladu s priporočili Evropskega združenja za preučevanje jeter leta 2015 se predlaga uporaba metod za določanje virusne RNK z občutljivostjo 15 ie / ml ali manj.

Glede na občutljivost testnega sistema pacient prejme enega ali drugega rezultata študije:

  • Najmanjša občutljivost analizatorja COBAS AMPLICOR je 600 IE / ml (analizator stare generacije).
  • Najmanjša občutljivost analizatorja HCB-TEST COBAS AMPLICOR je 50 ie / ml, kar je 100 kopij na ml.
  • Najmanjša občutljivost analizatorja HCV RealBest RNA je 15 ie / ml, kar je 38 kopij na ml (vključeno v skupino sodobnih testnih sistemov). Specifičnost teh analizatorjev je 100%. Z njihovo pomočjo se odkrijejo RNA virusov hepatitisa C podtipov 1a in 1b, 2a, 2b, 2c in 2i, 3, 4, 5a in 6.

Če obstajajo kopije RNA pod pragom občutljivosti tega analizatorja, pacient prejme odgovor "ni zaznan".

Sl. 4. Primer analize PCR (kvantitativni test). Virusna obremenitev je določena za hepatitis C.

Razlaga rezultatov analize PCR za hepatitis C

  • Odsotnost virusa RNA kaže na odsotnost okužbe.
  • Odsotnost RNA proti prisotnosti protiteles v krvi kaže na izginotje virusa hepatitisa C pod vplivom zdravljenja ali samozdravljenja.
  • V nekaterih primerih je virus prisoten v krvi, toda na subliminalnih ravneh, kadar njegova koncentracija ni zajeta s pomočjo analizatorjev. Taki bolniki ostajajo nevarni glede okužbe.
  • Odkrivanje virusa RNA za 6 zaporednih mesecev pri bolnikih z akutnim hepatitisom C kaže, da je bolezen vzela kronični potek.
  • Zmanjšanje virusne RNK med zdravljenjem kaže na učinkovitost terapije in obratno.

Sl. 5. Maščobna hepatoza. Eden od vzrokov za poškodbo jeter je virusni hepatitis C.

Osnovni biokemični preiskavi krvi za hepatitis C

Biokemični preiskavi krvi pomagajo vzpostaviti funkcionalno stanje mnogih človeških organov in sistemov.

Jetrni encimi ALT in AST

Jetrni encimi se intracelularno sintetizirajo. Vključeni so v sintezo aminokislin. Veliko jih najdemo v celicah jeter, srca, ledvic in skeletnih mišic. S porazom organov (kršitev integritete celičnih membran), encimi vstopajo v kri, kjer raste njihova raven. Povišane ravni encimov so registrirane pri porazu (lizi, uničenju) celic jeter, miokardnega infarkta in drugih bolezni. Višja je raven transaminaz v serumu, več celic je bilo uničenih. ALT prevladuje v celicah jeter, AST - v miokardnih celicah. Z uničenjem jetrnih celic se raven ALT poveča 1,5-2 krat. Z uničenjem miokardnih celic se raven AST poveča za 8 do 10-krat.

Pri diagnosticiranju kroničnega virusnega hepatitisa je treba upoštevati razmerje AST / ALT (de Ritisov koeficient). Prevelik AST nad ALT kaže na poškodbe jetrnih celic.

  • Norma AST za moške je do 41 enot / l, ženske - do 35 enot / l, otroci starejših od 12 let - do 45 enot / l.
  • Norma ALT za moške je do 45 enot / l, ženske - do 34 enot / l, otroci do 12 let in več - do 39 enot / l.
  • Običajno (pri zdravih ljudeh) razmerje AST / ALT znaša od 0,91 do 1,75.

Bilirubin

Bilirubin je produkt razgradnje hemoglobina. Bilirubin v krvi najdemo v obliki posredno (do 96%) in neposredno (4%). Proces razgradnje te snovi se pojavlja predvsem v celicah jeter, kjer se iz telesa izloča z žolčem. Z uničenjem jetrnih celic se raven bilirubina v serumu poveča. Običajno je celotna vsebnost bilirubina manjša od 3,4 - 21,0 μmol / l. Na ravni 30-35 μmol / L in več, bilirubin penetrira v tkiva, zaradi česar sta koža in sklera postala žolč.

Sl. 6. Če hepatitis C v krvi zviša raven bilirubina. Snov prodre v tkiva, zato sta koža in sklera postala žolčasta.

PCR diagnostiko za hepatitis C

Hepatitis C je vnetje celic jeter, ki nastane zaradi okužbe z virusom HCV (hepatitisom C) s stikom s krvjo okužene osebe. Genetsko kodo flavivirusa HCV nosi molekula RNA (ribonuklenična kislina), ki jo vsebuje struktura virusa. Ta življenjsko nevaren pojav odlikuje tajnost v začetni fazi patologije. Časovni interval med okužbo in pojavom simptomov (odziv imunskega sistema) je lahko od enega meseca do šest mesecev. Bolezen je praviloma kronična in je težko ozdraviti.

Sodobna medicina vam omogoča diagnosticiranje patologije z manjšimi poškodbami jeter. Najpogostejše in učinkovite diagnostične metode vključujejo PCR analizo. Razmislite v tem članku, kaj je in kakšne vrste obstajajo.

Kakšna je študija

PCR analiza za hepatitis C je laboratorijski pregled, ki zazna flavirus, genetski material ribonukleinske kisline (RNA). Določa število molekul RNK v krvi, kakovost biološkega materiala, genetski tip HCV flavirusa.

Metoda PCR za hepatitis C omogoča odkrivanje najmanjše količine flavirusa pred nastankom protiteles, praviloma kmalu po okužbi.

Študija se pogosto imenuje analiza RNA, ker zazna delce ribonukleinske kisline, ki imajo v flavavirju velikost 30-60 nm.

Študija poteka na naslednji način: na prazen želodec pacient daje veno krvi, ki jo nato testirajo z različnimi metodami:

  • PCR v realnem času se izvaja zaprt avtomatiziran način in ima spodnjo mejo za odkrivanje virusov RNA 15 IE / ml;
  • COBAS AMPLICOR z občutljivostjo 50-100 ie / ml.

Višji je prag občutljivosti diagnostične tehnike, večje so možnosti odkrivanja najnižje vsebnosti virusa v biološkem materialu, ki se preiskuje.

Katere vrste analize se uporabljajo

Analiza, ki se že več desetletij uspešno uporablja, se imenuje PCR hepatitis in jo je mogoče odkriti zelo enostavno in hitro. V medicini obstajajo dve reakcijski reakciji, ki so bistveno drugačni:

  • kvalitativna metoda razkriva prisotnost v biološkem materialu genetskega vira določenega virusa;
  • kvantitativna analiza meri število genetskih snovi, ki omogoča določanje stopnje patologije ali oceno učinkovitosti terapevtskega programa;
  • genotipizacija določa vrsto virusa, prisotnega v telesu.

Na splošno krvni test pomaga ugotoviti naravo viremije in genetskega tipa patogena. Študija se praviloma opravi 1-krat, odvisno od stopnje občutljivosti diagnostičnega sistema. Če je potrebno, ponovite testiranje z ultraznačnim reagentom.

Visoka kakovost PCR

Kaj je kakovostna PCR RNA za hepatitis C? Bistvo reakcije je v prisotnosti sekvence RNA hepatitisa in reakcija je možna samo v prisotnosti virusnih proteinov s podobno etimologijo v ELISA. V postopku primerjave se zazna obremenitev in možna poškodba jeter.

Posebna značilnost te metode je sposobnost odkrivanja celo prisotnosti ločenega gena.

Opozoriti je treba, da pacient po prejemu rezultatov testa PCR in ELISA potrebuje ustrezno zdravljenje, ne glede na to, kakšen je bil končni rezultat imunoassayovega encima. Pozitivno kaže na okužbo, PCR negativno pa kaže na zmanjšano število virusnih delcev glede na stopnjo občutljivosti.

Obstaja več pogojev, ki vplivajo na proizvodnjo negativnega PCR in ELISA:

  • pomanjkanje ustreznih pogojev za zbiranje gradiva;
  • posledična analiza vsebuje kontaminacijo;
  • v primeru zgodnje injekcije heparina bolniku.

S strani pacienta ni treba upoštevati določenih pravil za vzorčenje krvi za PCR analizo, v tem primeru je kakovost te analize odvisna od zdravstvenega delavca, ki izvaja postopek. Sposobnost ugotavljanja prisotnosti bolezni (zlasti v akutni obliki) se pojavi v nekaj tednih po okužbi.

Kvantitativna analiza

Kvantitativno testiranje je priporočljivo za odkrivanje virusnega bremena tik pred nastankom nadaljnje terapije in reakcijo telesa. Postopek vzorčenja krvi poteka na podoben način, da je pri visokokakovostnih PCR in ELISA edini pogoj odsotnost možnosti, da bi bolnik pred kajenjem kadil.

Kar zadeva značilnosti podatkov, pridobljenih kot rezultat študije, je povečana obremenitev označena z indikatorji od 800000 ie / ml, nizki - 400000 ie / ml. Prisotnost virusa v pacientovem telesu je označena z PCR za hepatitis ni negativen kvalitativni test.

Tovrstne raziskave omogočajo ugotoviti, kako nevarni je bolnik do ljudi okoli njega. Na primer, ugotavljanje visoke ravni pomeni povečano infektivnost bolnika. Poleg tega rezultati analize pripomorejo k oblikovanju nadaljnjega najučinkovitejšega zdravljenja in določijo, koliko obstoječe terapije velja za učinkovito.

Hitro negativno odzivnost testov kaže na uspeh izbrane tehnike, počasna pa kaže na potrebo po prilagoditvah in uporabi različnega zdravljenja.

Postopek analitskega postopka je odvisen od določenega dne bolezni. Prva določitev se izvede prvi dan po tem, ko je bolnik sprejet v bolnišnico, nato se postopek ponovi pri 4, 12 in 24 tednih po jemanju zdravil.

Tako kvantitativna analiza kaže, katero zdravljenje je najučinkovitejše, trajanje razpoložljivega zdravljenja in bolnikova nevarnost v odnosu do drugih ljudi.

Genotipizacija

V študiji materialne analize je pomembno določiti natančnost genotipa virusa, ki poteka. Trenutno obstaja 11 vrst virusov hepatitisa C, ki vključujejo tudi nekatere podvrste.

Vse te vrste se različno odzivajo na različna zdravljenja, posamezne vrste pa so odporne na veliko zdravil.

Genotip omogoča določanje in prikaz stanja jeter. Ni neobičajno, da se rezultati zabeležijo kot "ne tipirami", kar pomeni, da ta testni sistem ne zazna virusa v pacientovi krvi. To je mogoče zaznati, če določen genotip ne ustreza temu območju. V takšni situaciji se analiza vzame večkrat, za preučevanje gradiva pa se uporablja bolj občutljiv sistem.

Ultra občutljiva metoda

Ultrasenzitivna metoda je potrebna v nekaterih primerih, ko diagnosticiranje hepatitisa ni mogoče izvesti z drugimi metodami, in kdaj je potrebno analizirati, določi zdravnik, ki se je udeležil:

  • v primeru suma prisotnosti virusa hepatitisa C pri bolnikih z latentnim tipom bolezni;
  • prisotnost protiteles proti virusu hepatitisa C, ki ni potrjena s PCR diagnostiko;
  • da bi ugotovili kakovost učinkovitosti izbrane metode zdravljenja in potrdili odpravo bolezni.

Občutljivost te metode je veliko višja od tistih, ki se običajno uporabljajo, vendar ta metoda ne izključuje pridobivanja napačnih rezultatov, pozitivnih in negativnih. V takšni situaciji je pomembno nadzirati kakovost postopka in možnost kontaminacije materiala samega.

Pojasnilo PCR analize

Dekodiranje analize poteka na podlagi predstavljenih materialov, rezultati laboratorijskih študij pa vsebujejo določene podatke, opisane zgoraj.

Decodiranje lahko vključuje pozitivno PCR polimerazno verižno reakcijo in negativno ELISA v testu, kar pomeni, da bolnik nima znakov hepatitisa C v krvi, vendar je v preteklosti prenašal akutno obliko bolezni. Med diagnosticiranjem se strokovnjaki praviloma odločijo za uporabo kazalnikov testa PCR.

Če povzamemo vse zgoraj navedeno, lahko sklepamo, da se pri analizi je treba upoštevati vsa pravila in priporočila, da so dobljeni rezultati čim bolj natančni, in biti sposoben ugotoviti učinkovitost terapije se uporablja in nadaljnje možnosti za popolno okrevanje na podlagi pridobljenih podatkov.

PCR analiza za hepatitis C

Za diagnozo "kroničnega virusnega hepatitisa C (CVHS)" je potreben celovit pregled osebe, ki vključuje klinične, laboratorijske in instrumentalne študije. Pomembno z vidika diagnoze za pravilno diagnozo je PCR metoda - polimerazna verižna reakcija.

Kaj kaže ta analiza in zakaj je to potrebno?

Ta laboratorijska metoda zazna RNA virusa hepatitisa C v človeški krvi. Skupaj z encimsko vezanim imunosorbentnim testom (ELISA) za protitelesa proti virusu se PCR uporablja za diagnozo CVHC in njegovega genotipa patogena. Ta raziskava je ena najnovejših metod laboratorijske diagnostike. Njegova zanesljivost pri CVHS presega 97%, kar velja za zelo dober kazalnik za raziskave.

Za CVHC je na voljo tri krvne preiskave PCR: kvalitativna, kvantitativna in genotipizacija virusa. Prva študija (kvalitativna analiza) virusa zazna v krvi in ​​se zato uporablja samo za diagnozo.

Druga (kvantitativna) študija določa stopnjo virusne obremenitve na telesu, zato se uporablja za spremljanje učinkovitosti terapije.

Tretji PCR (genotipizacija) pojasnjuje diagnozo, ki določa genotip virusa, kar je zelo pomembno za določitev pravilnega protivirusnega zdravljenja.

Bistvo tehnike verižne reakcije s polimerazo je uporaba encimov, ki množijo genetski material patogena v biomaterialu. V postopku takega replikacije se cev s krvjo večkrat segreva in ohladi na temperaturo, potrebno za pospešitev encimske reakcije. Zaradi teh manipulacij se količina virusnega genoma večkrat poveča, kar omogoča, da jo zaznamo tudi z minimalno količino.

Diagnostika PCR ima veliko prednosti pred drugimi laboratorijskimi testi:

  • visoka občutljivost - 97-98%;
  • zajamčena analitična specifičnost (natančno odkrije patogen, ki ga želite najti, in ne s svojimi povezanimi napori);
  • hitrost vodenja (za dokončanje ne potrebuje več kot 2 dni).

Tri vrste testov PCR

Visoka kakovost PCR analize je dodeljena vsem bolnikom, pri katerih je ELISA analiza odkrila protitelesa proti virusu HVGS. Po izvedbi visoko kakovostnega PCR lahko dobimo dve možnosti odziva: "RNA je zaznana" ali "RNA ni zaznana." Za odkrivanje najmanjše količine virusa v krvi so potrebni testni sistemi z občutljivostjo najmanj 50 ie / ml. Če je koncentracija virusa v pacientovi krvi manjša od diagnosticuma, lahko rezultat študije lažno negativno. Da bi se izognili takšni diagnostični napaki, bi morali laboratoriji, ki izvajajo diagnostiko PCR, zagotoviti zelo občutljive testne sisteme. V laboratoriju "Invitro" se na primer uporabljajo testi z občutljivostjo 15 ie / ml. Laboratorijski delavci morajo na prvi poziv zagotoviti informacije o občutljivosti testov pacientom in zdravnikom.

Kvantitativna analiza PCR določa stopnjo viremije, to je koncentracijo patogena v krvi, virusno obremenitev. Rezultat te študije, za razliko od visokokakovostnega PCR, je izražen v številkah, na primer 2 × 10 * 6 ie / ml, kar pomeni 2 milijona mednarodnih enot v 1 ml krvi. Nekateri laboratoriji uporabljajo drug kazalnik - število kopij / ml. Ti dve indikatorji so enostavni za pretvorbo: 1 mednarodna enota je enaka 4 kopije RNK. Tako bo 2 × 10 * 6 ie / ml pomenilo, da 8 x 10 * 6 kopij virusne RNK v 1 ml, tj. 8 milijonov izvodov v 1 ml krvi.

Genotipizacija je opredelitev enega od šestih genotipov virusa. Klinična slika, stopnja razvoja zapletov jeter in napoved bolnikovega življenja v prihodnosti sta odvisna od genotipa povzročitelja. Genotip virusa je zelo pomemben že v fazi diagnoze, saj je kombinacija zdravil in trajanje terapevtskega poteka, ki ga je treba dodeliti bolniku, odvisna od njegove pravilne določitve.

Toda tudi ta navidezno "popolna" laboratorijska raziskava ima svoje slabosti:

  • študija replicira genetski material vseh povzročiteljev bolezni, tudi neživih, kar lahko izkrivlja rezultat. Zato je za spremljanje učinkovitosti s pomočjo PCR reanaliza izvedena ne prej kot 2 meseca po prejšnjem, tako da lahko mrtvi virusi zapustijo bolnika;
  • del virusnega genoma, ki se določi z uporabo testnih sistemov, je lahko teoretično prisoten v drugih virusih ali mikroorganizmih, zato obstaja možnost lažnega pozitivnega odziva;
  • virusi mutirajo hitro. Včasih je hitrost in obseg mutacije virusa tako visoka, da testni sistem preneha ujati svoj genom. Posledično je možen lažen negativen rezultat.

Proizvajalci laboratorijskih testnih sistemov za diagnozo PCR neprestano izvajajo svoje teste, vključno z navzkrižnimi reakcijami in občutljivostjo na določen genotip virusa.

Kako vzeti test PCR za hepatitis C?

Da bi bil zaključek preverjanja PCR zanesljiv, je treba strogo upoštevati pravila za pripravo svojega ravnanja:

  • raziskave se izvajajo na praznem želodcu (glukoza, maščobe, minerali, ki vstopajo v krvi iz hrane, lahko vplivajo na hitrost in kakovost encimske reakcije);
  • mora biti razlika med zadnjim obrokom in vzorčenjem krvi za analizo najmanj 8 ur;
  • na predvečer študije je prepovedano jemati alkohol in uživati ​​maščobno hrano, katere obdobje podaljšanja je podaljšano;
  • dan pred odhodom v laboratorij se mora izogibati močnemu fizičnemu in čustvenemu stresu;
  • dokler se čas vzorčenja krvi ne priporoča za kajenje.

Da bi se izognili pojavu napačnih sklepov, naj bi domnevni bolnik prišel v laboratorij malo prej kot kri. Za osebo, ki ujame dih, traja 15-20 minut, se pomiri. Adrenalin, ki je v krvi prisoten po hitrem hodu, lahko vpliva na rezultat pregleda.

Če se bolnik, ki se ji je izrekel za analizo, jemlje zdravila, o tem obvesti zdravnika. Možno je, da bodo nekatere od njih nekaj časa zavrnile (če je mogoče).

Rezultat analize PCR za hepatitis C

Dekodiranje rezultatov v laboratoriju laboratorija laboratorija, ki je izvedla analizo. Decodiranje je definicija odstopanja rezultatov, pridobljenih od norme. Stopnjo indikatorjev neposredno ugotovi proizvajalec preskusnega sistema, ki ga laboratorij uporablja za diagnostiko. Zato ni presenetljivo, da je v nekaterih laboratorijih virusna obremenitev določena v IU / ml, v drugih pa v kopijah / ml.

Po prejemu sklepa je treba to pravilno razlagati. Zdravljenje rezultatov študije mora opraviti zdravnik bolnika s hepatitisom C. Šele po objektivnem, instrumentalnem in laboratorijskem pregledu bolnika lahko zdravnik pridobi zadostno količino podatkov za pravilno interpretacijo dobljenih rezultatov PCR.

Vrednotenje kvalitativne analize praviloma ne povzroča težav, tudi pri bolnikih. Rezultat je lahko samo eden: "zaznan" ali "ni zaznan." V tem primeru je druga od njih norma.

Indikatorje kvantitativne analize je težje razlagati. Prikazuje stopnjo virusne obremenitve pacienta. Tudi med hepatologi ni soglasja o tem, kako zdraviti odkrito viremijo. Večina zdravnikov je prepričana, da je treba razmisliti o visoki obremenitvi več kot 8 × 10 * 5 ie / ml. Obremenitev več kot 1 × 10 * 7 ie / ml se šteje za zelo visoko, medtem ko je majhna obremenitev manjša od 4 × 10 * 5 ie / ml.

Stopnja virusne obremenitve kaže na virulentnost (agresivnost) virusa: večja je njegova količina v krvi, hitreje se lahko pojavijo zapleti jeter. Visoka koncentracija virusa v krvi nosečnice poveča verjetnost njenega prodiranja skozi hemato-placentalno pregrado do ploda. Viremia vpliva tudi na učinkovitost zdravljenja: z nizkimi številkami je učinkovitost terapije višja kot pri visokih.

Da bi bili prepričani v točnost analize PCR za hepatitis C, je treba dati prednost samo tistim laboratorijem, ki so dobro delali. Politika cen v tem primeru ne sme imeti primarne vloge.


Več Člankov O Jetrih

Hepatitis

Kakšne vrste rib imate opisthorchiasis: so peleni, lica in ščuka bolni?

Opisthorchiasis - bolezen, ki se pojavi zaradi zaužitja parazitskih mikroorganizmov. Ker patogeni opisthorhidnega rodu prodirajo telo zdrave osebe skozi hrano, predvsem prek rib, se mnogi zanimajo za kakšno ribe obstaja opisthorhijaza.
Hepatitis

Hepatoprotectors

Hepatoprotečniki so zelo priljubljena orodja, ki se uporabljajo za zdravljenje in zaščito jeter pred škodljivimi dejavniki. Njihova priljubljenost je posledica povečanja števila bolnikov z različnimi boleznimi tega organa - predvsem virusnega hepatitisa.